單細胞懸液制備儀對肝組織單細胞懸液制備步驟及實(shí)驗效果|細胞得率高達90%

單細胞技術(shù)已經(jīng)廣泛應用于腫瘤，免疫，發(fā)育生物學(xué)，神經(jīng)科學(xué)，細胞治療，藥物研發(fā)及動(dòng)植物研究中。但并不是所有的組織都適用于單細胞RNA測序，現階段單細胞RNA測序研究的一個(gè)極大的挑戰仍是如何獲得高質(zhì)量的單細胞懸浮液?？蒲姓邌渭毎麘乙褐苽鋬x具有起始組織量小，時(shí)間短，細胞得率高，細胞活性高的特點(diǎn)。帶加熱功能，對樣品的消化處理過(guò)程始終處在恒溫狀態(tài)，細胞得率高達90%，方便了對真核生物進(jìn)行單細胞核RNA測序。

此次的實(shí)驗樣品為肝組織，肝是人體最大的腺，可分泌膽汁，合成多種蛋白質(zhì)和脂類(lèi)物質(zhì)。肝細胞能進(jìn)行物質(zhì)的合成、分解、轉化、貯存。作為消化器官，肝臟參與糖、脂類(lèi)、蛋白質(zhì)三大基本物質(zhì)的代謝。

實(shí)驗設備：單細胞懸液制備儀 JX-CKSM-4WK

實(shí)驗步驟：

1、打開(kāi)儀器電源開(kāi)關(guān)，將儀器界面中的模塊加熱和熱板加熱點(diǎn)開(kāi)，將其兩者先預熱恒溫到37℃左右。

2、將穿刺成長(cháng)條的樣本剪一部分下來(lái)直接放入凈信2ml研磨管中。

3、加入凈信消化酶，旋上蓋子，上下微微晃動(dòng)研磨管將其組織和消化酶均勻混合。

4、將混合好的研磨管放入加熱模塊中，將其研磨管中的樣品和試劑恒溫至37℃后，再將研磨管放入熱板中，蓋上蓋子。

5、啟動(dòng)Program 2（25min）

6、待儀器程序時(shí)間到之后出現滴滴的提示音，則打開(kāi)儀器蓋子，取出樣品管

7、將樣品管中的液體和剩下的組織一起倒入過(guò)濾管中，然后再加入終止液（避免消化酶將液體中的單細胞也消化完了），得到的液體，即單細胞懸液。

實(shí)驗效果：

樣品制備前后效果對比圖

以上就是此次單細胞懸液制備儀對肝組織的研磨全過(guò)程，可供大家進(jìn)行參考，需要注意是消化酶和終止液均需要在冷凍環(huán)境下保存，消化酶解凍時(shí)需在常溫條件下解凍，不可以放入水浴或者其他加熱儀器中解凍，溫度升高對酶的活性會(huì )有很大的影響。